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Columnas Thermo Scientific AccuCore™ |
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El Nuevo Concepto CET (Core Enhanced Technology) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Obtenga las máximas prestaciones cromatográficas sin las restricciones impuestas por la instrumentación más moderna Thermo Scientific ha desarrollado las nuevas columnas para HPLC AccuCore™ basadas en un NUEVO concepto de Tecnología CET (Core Enhanced Technology) de 2.6 mm...
La tecnología desarrollada en AccuCore™, ofrece prestaciones fuera del alcance de otras fases peliculares...
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Evolución de la Partícula | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
En la búsqueda de separaciones mejores y más rápidas el tamaño y forma de la partícula ha evolucionado durante décadas desde la invención de HPLC. Los materiales de relleno han evolucionado desde partículas peliculares irregulares grandes hasta partículas esféricas totalmente porosas con diámetros menores de 2 mm.La tecnología CET (Core Enhanced Technology) ha vuelto a revolucionar la técnica: estas partículas no son totalmente porosas, sino que tienen un núcleo sólido y una capa externa porosa.
La Tecnología CET ofrece las ventajas asociadas con las partículas de menos de 2mm -separaciones rápidas de alta resolución- sin las altas contrapresiones requeridas por esta clase de fases. |
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Teoría de la Cromatografía RÁPIDA | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Las curvas de Van Deemter y cinéticas muestran la importancia del diámetro y tipo de partícula en la eficacia cromatográfica. Las mayores eficacias y la menor velocidad de pérdida de eficacia al incrementar el caudal se encuentran en las partículas de menor diámetro y en las de tipo CET.
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Cómo Funciona la Tecnología CET | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Los dos factores que afectan fuertemente a la eficacia cromatográfica son la transferencia de masas y la difusión turbulenta, los términos C y A de la ecuación de Van Deemter
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Más Rápidas que las columnas de 5 y 3mm... | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Con las columnas de HPLC AccuCore™ se consiguen separaciones excelentes en tiempos más cortos. Los ejemplos muestran como, aumentando el caudal se mantiene la eficacia y, en consecuencia, la resolución, mientras que el tiempo de análisis se reduce 3 veces y los costes de solvente 7 veces.
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...y, si necesita mayor velocidad, ¡columnas cortas! |
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El poder de separación de las columnas para HPLC Accucore™ permite el uso de dimensiones más cortas manteniendo una resolución aceptable, aumentando la capacidad analítica y reduciendo todavía más los costes analíticos
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Mayor Capacidad de Pico que en columnas de 3 y 5 mm | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Como alternativa a la velocidad la elevada Resolución de las columnas para HPLC Accucore™ permite la separación de mezclas complejas por su elevada Capacidad de Pico. (A mayor capacidad de pico, más analitos pueden identificarse por análisis)
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Mayor Sensibilidad que en columnas de 3 y 5 mm | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Según la fórmula, los picos más estrechos y altos obtenidos con columnas para HPLC Accucore™ resultan en una mayor relación señal/ruido (S/N) y, en consecuencia, mayor sensibilidad.
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Prestaciones Equivalentes a columnas de UHPLC con menor contrapresión | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Con el diseño de núcleo sólido CET, distribución estrecha de tamaño de partícula y empacado uniforme del lecho las columnas para HPLC Accucore™ tienen prácticamente las prestaciones equivalentes a las de columnas de UHPLC con partículas sub-2μm, y generan una fracción de la pérdida de carga. NO ES NECESARIO UN EQUIPO UHPLC.
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Capacidad de Carga | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Una de las limitaciones de
las columnas con partículas de núcleo sólido ha sido una cierta
limitación en la capacidad de carga. Las columnas para HPLC Accucore™
con tecnología CET, no sufren este inconveniente y permiten
la determinación de analitos en un amplio rango de concentraciones.
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Rápida Transferencia de Métodos | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Sólo son necesarios tres
breves pasos:
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Columnas de Larga Vida Útil | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Para que una columna tenga una gran vida útil se necesita la Estabilidad Mecánica de la Fase y una Química estable: las columnas para HPLC Accucore™ con tecnología CET, gracias al control riguroso control de la partícula y del proceso de empacado poseen una excelente estabilidad mecánica. Su avanzada química de enlace crea fases robustas altamente resistentes a los efectos del pH y temperatura.
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Cromatografía Reproducible | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Solo puede conseguirse una
cromatografía reproducible con un estricto control de las
características Químicas y Físicas de la Fase.
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Caracterización de la Sílice: Tamaño de Partícula y Distribución | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Tamaño
de Partícula y Distribución |
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Tests Cromatográficos | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Las características de
retención de un material de fase reversa pueden dividirse en
interacciones hidrofóbicas que incluyen la medida de la hidrofobicidad
del ligando y su densidad, selectividad estérica e interacciones
secundarias como la actividad de los silanoles y metales superficiales.
El impacto de la interacción entre los silanoles y los analitos depende
del pH de la fase móvil: los silanoles de la superficie de la sílice
pueden causar enlaces de hidrógeno y los silanoles disociados pueden
intercambiar iones con bases protonadas. Para asegurar separaciones consistentes y predecibles las fases AccuCore CET se caracterizan ampliamente con unos tests de diagnóstico basaos en los desarrollados por Tanaka que miden la hidrofobicidad, la selectividad estérica y las interacciones secundarias con bases, ácidos y quelantes. |
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Interacciones Hidrofóbicas:
Retención Hidrofóbica (HR) La primera interacción hidrofóbica que se mide es la Retención Hidrofóbica (HR). El factor de capacidad k de un hidrocarburo neutro como el pentilbenceno indica la hidrofobicidad de la fase estacionaria y, consiguientemente, una medida de la carga de carbono de la sílice. |
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Interacciones
Hidrofóbicas: Selectividad Hidrofóbica (HS) La segunda medida de interacción hidrofóbica es la Selectividad Hidrofóbica (HS). El factor de selectividad entre el pentilbenceno y el butilbenceno indica una medida del recubrimiento de la fase: estos dos alquilbencenos difieren únicamente por un grupo metilénico y su selectividad depende de la densidad del ligando. |
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Interacciones Hidrofóbicas: Selectividad
Estérica (SS) El test se basa en la relación de K entre o-Terfenilo y el Trifenileno. Ambos compuestos tienen el mismo tamaño molecular pero difieren fuertemente en su disposición espacial: el Trifenileno es planar y el o-Terfenilo presenta un anillo fuera del plano. En general las columnas de enlace polimérico muestran un mayor grado de electividad estérica que sus equivalentes de enlace monomérico |
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Interacciones Hidrofóbicas:
Enlace de Hidrógeno (HBC) La capacidad de crear enlaces de hidrógeno (HBC) de la fase estacionaria se mide determinando el factor de selectividad entre la cafeína y el fenol que indica el número de grupos silanoles libres y el nivel de bloqueo (End Capping). Un valor bajo indica un bajo nivel de silanoles disponibles para crear enlaces de hidrógeno y la robustez del bloqueo. |
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Interacciones
Secundarias:
Actividad frente a Compuestos
Básicos (BA) La presencia de silanoles disociados a pH>7 provoca mediocres formas de pico de compuestos básicos protonados como la amitriptilina. Las interacciones secundarias de intercambio iónico y las causadas por los silanoles pueden causar cambios en los tiempos de retención y picos asimétricos así que el factor de capacidad y el valor de la asimetría del pico de la amitriptilina son indicativas de la prestación general de la columna. Para este compuesto las columnas AccuCore CET muestran una excelente forma de pico indicando una sílice altamente desactivada. |
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Interacciones
Secundarias: Compuestos Quelantes
(C) Las interacciones superficiales con los metales presentes en la sílice pueden provocar cambios en la selectividad o en la forma de pico de los compuestos quelantes como la quinizarina: cambios en el factor de capacidad y el valor de la asimetría del pico indican interacciones secundarias con las impurezas metálicas de la sílice. La excelente forma de pico de las columnas AccuCore CET muestran un contenido excepcionalmente bajo de iones metálicos. |
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Interacciones
Secundarias:
Capacidad de
Intercambio Iónico a
pH 7.6 (IEXC7.6) El factor de selectividad entre la bencilamina y el fenol indica la actividad total de los silanoles de la sílice. A pH>7 los silanoles están disociados y se suman a los sitios de intercambio iónico para modificar la retención de la bencilamina. |
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Interacción
Secundarias: Interacciones con Compuestos Ácidos (AI) La inercia de la fase estacionaria frente los compuestos ácidos resulta muy importante puesto que estas especies pueden resultar adsorbidas en los materiales de fase reversa. El factor de capacidad y el valor de la asimetría del pico del ácido clorocinnámico indican la actividad de la fase frente a compuestos ácidos. Para este compuesto las columnas AccuCore CET muestran una excelente forma de pico indicando un alto grado de inercia frente a compuestos ácidos. |
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Interacción
Secundarias: Capacidad de Intercambio Iónico a pH 2.7 (IEXC2.7) Tanaka ha mostrado que la retención de aminas protonadas a pH<3 puede ser indicativo de la medida de los sitios de intercambio iónico en la superficie de la sílice. A este pH los grupos silanoles (Si-OH) no están disociados y no contribuyen a la retención de aminas protonadas, pero los silanoles libres ácidos en su forma disociada (Si-O-) si pueden interaccionar. El factor de selectividad entre el fenol y la bencilamina a pH 2.7 es indicativo de la contribución de los silanoles libres a los cambios de retención. |
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Especificaciones de las Fases | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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