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Cromatografía FLASH |
¿Qué es la Cromatografía FLASH? | ||
La Cromatografía
FLASH es un método de purificación de compuestos de síntesis que se basa
en Cromatografía de Líquidos de Media Presión, a diferencia de los
sistemas tradicionales por gravedad en columna que son mucho más lentos e
ineficientes. |
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Evolución de las Columnas FLASH | |||||||||
Fases Irregulares 60-40 mm | Fases Esféricas 60-40 mm | Fases Esféricas 50-40 mm | Fases Esféricas 30 mm | Fases Esféricas 15 mm | |||||
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Vea las Especificaciones de las Columnas puriFlash™ |
Eluyentes |
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La Cromatografía
FLASH es una evolución de la cromatografía en columna que todavía es de
uso general en los laboratorios de síntesis orgánica. En general el compuesto de interés, separado por TLC, ha de tener un Rf de 0.15 a 0.20 con el soporte y fase móvil seleccionada. La fase móvil, en general, es binaria con uno de los dos solventes de mayor polaridad para permitir ajustar fácilmente la polaridad media y optimizar la separación. En FLASH la fase estacionaria más usada es gel de sílice por lo que al aumentar la polaridad del solvente aumenta la velocidad de elución de todos los componentes de la mezcla. Las fases móviles binarias de polaridad creciente más usuales son cloruro de metileno/hexano, éter/hexano, hexano/etil acetato y cloruro de metileno/metanol. Estas fases móviles, excepto hexano/etil acetato, obligan a trabajar en campana de seguridad. En general si Rf ~0.2 será necesario usar un volumen de solvente equivalente a 5 veces el volumen del lecho de la columna para completar la separación. En FLASH instrumental las mezclas pueden ser más complejas: algunos instrumentos permiten el control de hasta cuatro eluyentes diferentes. El ejemplo muestra de nuevo la separación de una mezcla de dietil y dimetil ftalato en condiciones de gradiente (ciclohexano:etil acetato 100:0 a 85:15 en 7' + 13') y gradiente optimizado. A un caudal de 30 mL/min la contrapresión generada por las columnas de 50, 30 y 15 mm es respectivamente de 0.34, 1.03 y 19.65 bar. Estas prestaciones sólo se pueden conseguir con equipos FLASH de segunda generación como puriFlash™ XS520, 5.020, 5.050, 5.125 o 5.250. |
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Cantidad de Fase |
La cantidad de
fase de la columna necesaria para una buena separación depende la diferencia de Rf entre los compuestos a
separar, de su cantidad, de la geometría de la fase y de su empaquetado. |
Empacado de la columna |
Uno de los mayores problemas en la cromatografía FLASH instrumental
surge de la calidad de la fase y del empacado de la columna. Una
columna mediocremente realizada o empacada con fases de granulometría
dispersa genera una menor reproducibilidad que la que se obtiene con
partículas perfectamente caracterizadas lote a lote y procedimientos de
empacado desarrollados en la producción de columnas analíticas y
semipreparativas de alta calidad. Interchim no solo es uno de los mayores
fabricantes de columnas de HPLC sino que además produce soportes con
tecnología propia y estrictos controles de calidad, que aplica en la
producción de columnas FLASH para garantizar la máxima calidad y
prestaciones constantes lote a lote.. |
Instrumentos: puriFlash® Generation 5 | |||
La instrumentación necesaria en cromatografía FLASH puede ser tan simple
como una bomba isocrática combinada con una columna FLASH tipo PF-50SIHC/40, o un
sofisticado sistema (ver puriFlash™
5.020 o puriFlash™
5.050) dotado de una bomba cuaternaria y generador de gradientes hasta 250 mL/min y 50 bar, detector UV-DAD con software de
detección automática de picos, colector de hasta 132 fracciones (con
tubos de 16x150mm), y capacidad
de operar con columnas de 2.5 g a 1.6 Kg que permiten purificar desde
0.5 g hasta 240 g de producto. La ventaja de operar a mayores presiones que los instrumentos actualmente disponibles es tan grande como ¡multiplicar X3 la velocidad de análisis o reducir un 30% el uso de disolventes! Para aplicaciones de gran tamaño puriFlash™ 5.007 es la solución ideal o para aquellos usuarios con presupuesto limitado pero que quieran obtener las ventajas de la UPFP el modelo XS520 cumplirá con las expectativas de las purificaciones más exigentes. Los equipos PF5.050, PF5.125 y PF5.250, tanto en las versiones para Flash y LC-Prep, como las especialmente diseñadas para péptidos, permiten prestaciones UPFP y LC-PREP con columnas hasta 5 um y D.I. hasta 80 mm (según modelos). El equipo el PF5.400 ha sido especialmente diseñado para ser usado con columna LC-Prep de partícula inferior a 5 um permite obtener la máxima resolución en LC-Prep así como el desarrollo y escalado de métodos. Además del sistema estándar de detección basado en UV-Vis con tecnología DAD, Interchim dispone de sistemas de detección ELSD y en nuevo MSD cuadrupolar Ultra Compacto para detección po Masas con fuentes ESI y APCI. |
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Muy Pequeño, Muy Potente, Muy Impresionante | Muy pequeño, Muy poderoso, Muy automático... | El Compañero de los Retos Diarios | La Productividad del Laboratorio |
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El Especialista en Proteínas |
El Puente entre Flash y LC-Prep |
Purificaciones Complejas con Confianza |
El Especialista en Péptidos |
Muy Pequeño, Híper Potente |
Purificación de Mezclas Complejas de Péptidos |
La Ultra Purificación | Proceso - Kilo Lab |
puriFlash® Generation 5: Objetivos | ||||||
èCompactos y
Tecnológicos
El "Reducido Ámbito de Trabajo" mejora la ergonomía del instrumento. La productividad global del espacio de trabajo se amplifica drásticamente al tener muchas tecnologías (ELSD, UV, detector de fugas...) en un volumen tan reducido. Además, puede optar también por un montaje sobre banco, pues la "Campana de Vapores" incorporada permite la instalación en cualquier lugar disponible, dejando sus campanas de trabajo libres para la síntesis química. Al ser versátiles en términos de purificación, el ajuste de las tecnologías de detección garantiza el máximo rendimiento sin pérdida de producto. |
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èFiables
y Seguros
Vaya a 24/7 con confianza con un servicio post-venta mínimo. No tema malas sorpresas o costes ocultos tras la compra: el coste de uso es perfectamente controlable. Concéntrese en su trabajo con la tranquilidad de obtener la mejor purificación posible. No hay riesgo de pérdida de producto gracias gracias al control completo del sistema con sensores, el manejo de las sobre-presiones y pausas. El equipo estará disponible en todo momento y a largo término para la purificación. |
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èInterSoft®
X Compruebe el concepto KISS (Keeps Intelligence Simple & Smart). El diseño "Mejor en su Clase" hace más fácil la vida del químico. Permite el acceso a usuarios multi-perfil con un entrenamiento mínimo. La intuitiva Serie Gen5 "Amplía los Límites" con sus innovadoras tecnologías Flash & Go, Load & Go y Boost & go. Para desarrollar un método desafíe a "Genius" o hágalo Ud. mismo. |
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èGeniustm Su Inteligencia Artificial personal, incrustada en InterSoft® X genera la mejor eco-(lógica) purificación según el conocimiento actual. Ejecute con seguridad el método y ¡obtenga sus productos puros! |
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Flash&Go Fotografíe su placa TLC con nuestra aplicación para móviles (descárguela en https://goo.gl/givKvL), envíe los datos automáticamente a InterSoft ® X y "Genius" le creará el mejor método para su purificación. |
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Fotografíe su TLC con su Smartphone o descárguela de su Librería. |
Los compuestos se detectan automáticamente. Seleccione los de Interés con un toque. |
La aplicación calcula Rt y DCV (=DK). Indica si los Rf están en la zona adecuada para conseguir su purificación. |
Del menor DCV obtenido en su TLC, la aplicación le indica el nivel de dificultad de la separación. |
Indique los solventes, su proporción y sus comentarios en las áreas indicadas. |
Envíe la información directamente a su puriFlash® por bluetooth o wifi. ¡Intersoft “Genius” recomendará el método!. |
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Load&Go Cargue su muestra líquida o seca con nuestra válvula eléctrica multivía. InterSoft® X y "Genius" efectuará el equilbrado de la columna, la carga de la muestra y la limpieza del sistema. |
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Boost&Go La manipulación inteligente del aumento del caudal le acelerará con seguridad su purificación. |
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RFID Identificación de Columnas Flash & Prep, cartuchos de carga seca, racks, bucles de carga con implementación automática en "Genius". |
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Especificaciones de puriFlash® Generation 5 | ||||||
Cada sistema ha sido diseñado para cubrir las aplicaciones más exigentes: desde el básico XS520 de 300 mL/min y 20 bar, hasta el sofisticado PF5.400 de 125mL/min y 400bar. |
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