Las
columnas Hypersil Syncronis se han desarrollado para ofrecer una
separación consistente y reproducible imprescindible en el desarrollo de
nuevos métodos cromatográficos.
Las columnas Hypersil Syncronis se fabrican, empacan y comprueban
en instalaciones acreditadas bajo ISO 9000. Las propiedades físicas de
cada lote de sílice se comprueban exhaustivamente y sólo si se cumplen
las estrictas especificaciones de calidad impuestas pasan a la fase de
producción.
Cada lote de Fase ha de superar un riguroso test de interacciones
primarias y secundarias antes de pasar a la etapa de empacado
automatizado tras el que cada columna se comprueba para comprobar que
alcanza la calidad requerida.
Este intensivo y extensivo control de calidad asegura el suministro de
un producto consistente, columna tras columna.
Especificaciones de las Fases
FASE |
Partícula
mm |
Poro Å |
A. Sup. m2/g |
pH |
%C |
Bloqueo |
USP |
C18 |
1.7 y 5 |
100 |
320 |
2-9 |
16 |
SÍ |
L1 |
aQ |
1.7 y 5 |
100 |
320 |
2-8 |
19 |
Polar |
L1 |
C8 |
1.7 y 5 |
100 |
320 |
2-8 |
10 |
SÍ |
L7 |
Fenil |
1.7 y 5 |
100 |
320 |
2-8 |
11 |
SÍ |
L11 |
Amino |
1.7 y 5 |
100 |
320 |
2-8 |
4 |
SÍ |
L8 |
SiO2 |
1.7 y 5 |
100 |
320 |
2-8 |
- |
- |
L3 |
HILIC |
1.7 y 5 |
100 |
320 |
2-8 |
5 |
- |
- |
Caracterización de la Sílice:
Tamaño de Partícula y Distribución
Una separación
consistente requiere una base de sílice reproducible para lo que
un control estricto de las propiedades físicas de las partículas de
sílice es esencial. En cada lote de sílice Syncronis se controla
estrictamente el tamaño de la partícula y su distribución, el tamaño del
poro y su pureza.
Sólo los lotes que superan estos estrictos controles de calidad son
aceptados
Tamaño de Partícula
y Distribución
El
control estricto de la clasificación de partículas asegura que se
consigue una estrecha distribución de tamaños alrededor del tamaño
objetivo, consideración muy importante para una eficacia cromatográfica
consistente. En cada lote de sílice Syncronis fabricado se
comprueba el tamaño y distribución de partículas por nefelometría láser.
Dos tamaños de partícula están disponibles: 1.7mm
para separaciones UHPLC rápidas y 5mm
para análisis HPLC más convencionales.
Tamaño de Poro y
Área Superficial
El
control estricto del tamaño del poro y del área superficial son
elementos clave para asegurar una carga de carbono y unas propiedades
retentivas consistentes de la fase cromatográfica. Cada lote de sílice
Syncronis pasa un control de tamaño de poro y área superficial
mediante porosimetría con Nitrógeno Líquido. Las columnas Syncronis
se basan en sílice ultrapura de 100Å y un área superficial de 320 m2/g.
Esta mayor superficie en comparación con materiales más convencionales
de 200 m2/g permite el análisis de una gama de analitos más
hidrofóbicos y asegura una mayor capacidad de carga.
Pureza de la Sílice
La pureza del soporte es de importancia particular al considerar la
separación de compuestos polares y básicos. Las sílices de primera
generación contienen una gran cantidad de impurezas metálicas, y, si
éstas son especialmente electropositivas como el Aluminio, pueden
activar los grupos silanoles de la sílice haciéndolos altamente ácidos
generando picos con cola en solutos básicos. Las impurezas metálicas
pueden también crean complejos con especies con propiedades quelantes
con la consiguiente formación de picos asimétricos o con colas o con la
completa adsorción del compuesto si las interacciones son los
suficientemente fuertes.
Metal |
Na (ppm) |
Mg (ppm) |
Al (ppm) |
Ca (ppm) |
Fe (ppm) |
Zr (ppm) |
Especificación |
<10 |
<10 |
<10 |
<10 |
<10 |
<10 |
Lote A |
0.9 |
0.3 |
<1.0 |
<0.5 |
0.9 |
0.5 |
Lote B |
0.8 |
<0.1 |
<1.0 |
<0.5 |
0.8 |
1.1 |
Lote C |
1.1 |
<0.1 |
<1.0 |
<0.5 |
1.5 |
1.4 |
Lote D |
1.1 |
<0.1 |
<1.0 |
<0.5 |
0.8 |
1.4 |
Lote E |
1.3 |
0.4 |
1.4 |
0.8 |
1.1 |
1.2 |
Caracterización de las Fases
Las columnas
Syncronis se empacan con una gama de fases químicamente ligada y
bloqueadas para obtener diferentes selectividades en la separación. Sea
cual sea el tipo de fase se requiere un control estricto y
comprobaciones rigurosas del proceso de enlace químico para conseguir
una separación cromatográfica consistente. En cada lote de Fase
Syncronis se determina el porcentaje de carbono y se comprueba sus
características cromatográficas antes de seer empacada en la columna.
Carga de Carbono y
Recubrimiento Superficial
La
retención hidrofóbica de una fase estacionaria depende directamente con
la carga de carbono de la sílice. Un control preciso del porcentaje de
carbono resulta, pues, crucial para asegurar tiempos de retención
consistentes. Las columnas Syncronis están densamente enlazadas y
con doble bloqueo para minimizar el número de silanoles residuales
libres. En cada lote de fase se determina el porcentaje de carbono
mediante un Analizador de Carbono Total.
Tests Cromatográficos
Las características de retención de un material de
fase reversa pueden dividirse en interacciones hidrofóbicas que incluyen
la medida de la hidrofobicidad del ligando y su densidad, selectividad
estérica e interacciones secundarias como la actividad de los silanoles
y metales superficiales. El impacto de la interacción entre los
silanoles y los analitos depende del pH de la fase móvil: los silanoles
de la superficie de la sílice pueden causar enlaces de hidrógeno y los
silanoles disociados pueden intercambiar iones con bases protonadas.
Para asegurar separaciones consistentes y predecibles las fases
Syncronis se caracterizan ampliamente con unos tests de diagnóstico
basaos en los desarrollados por Tanaka que miden la hidrofobicidad, la
selectividad estérica y las interacciones secundarias con bases, ácidos
y quelantes.
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