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Columnas ThermoFisher Acclaim para Glicanos

 

ThermoFisher es un líder en tecnología de columnas para HPLC, incluyendo la fabricación de la sílice, la producción de las fases y el empacado de las mismas.

A partir de 2011, tras la adquisición de DIONEX™, ThermoFisher Scientific distribuye las muy conocidas columnas Acclaim™, tanto en sus versiones de Fase Reversa, HILIC, Modo Mixto, o las especialmente diseñadas para aplicaciones específicas como son el análisis de Ácidos Nucleicos, Aminoácidos, Carbohidratos, Glicanos, Péptidos y Proteínas, todas agrupadas bajo el epígrafe de Bio-Cromatografía.

Columnas Dionex Acclaim GlycanPac AXR-1

Análisis de Glicanos por HPLC de Alta Resolución con GlycanPac AXR-1

La columna Thermo Scientific GlycanPac AXR-1 es una columna de altas prestaciones basada en sílice que permite la separación simultánea de glicanos por carga, tamaño e isomerismo. Ha sido diseñada para análisis rápidos de alta resolución y velocidad con una selectividad única frente a los glicanos biológicamente importantes tanto nativos como marcados mediante detección por Fluorescencia o MS.

GlycanPac AXR-1 puede utilizarse para la caracterización cualitativa, cuantitativa y estructural de glicanos cargados y neutros presentes en moléculas biológica (p.e. proteínas).

  • Selectividad única basada en carga, tamaño e isomerismo de cadena o enlace

  • Resolución excelente tanto para glicanos nativos como marcados

  • Útil tanto para métodos de caracterización por barrido de alta resolución como para la cuantificación fácil basada en la carga

  • Compatible con detección FL y MS

  • Elevada eficacia cromatográfica y excelente estabilidad

  • Disponible en formato de 3 mm y 1.9mm

GlycanPac AXR-1, basada en una química innovadora de superficie de modo mixto, combina los mecanismos de retención tanto de intercambio aniónico débil (WAX) como de Fase Reversa  para una selectividad y poder resolutivos óptimos.

La funcionalidad WAX genera retención y selectividad para los glicanos cargados negativamente, mientras que el modo RP facilita la separación de glicanos de la misma carga según su tamaño e isomerismo.

Como resultado la columna GlycanPac AXR-1 ofrece capacidades incomparables para la separación de glicanos tanto en HPLC como en UHPLC con detección LC-FL y LC-MS con tampones acuosos volátiles (p.e. acetato o formiato de amonio) y acetonitrilo, que permite que los glicanos eluidos puedan ser analizados de inmediato por MS.

Las columnas GlycanPac AXR-1 usan substratos de sílice esférica de alta pureza tanto en 1.9 como en 3 mm para aplicaciones en UHPLC y HPLC estándar y se suministran en varias configuraciones para acomodarse a aplicaciones con diferentes necesidades de resolución, velocidad e instrumentales.

La caracterización estructural de cada glicano determinado en la columna GlycanPac AXR-1 se determina mediante datos de fragmentación MS/MS y análisis estructural con el software SimGlycan®. En muchos casos algunas estructuras de oligosacáridos aparecen idénticas por m/z y carga, pero eluyen en posiciones ligeramente diferentes en el gradiente. En muchos casos los resultados por MS describen completamente a los isómeros pero en otros los datos resultan insuficientes para elucidar completamente el enlace o ramificación de los isómeros. El hecho de que aparezcan en MS con valores m/z idénticos en HRAM (High Resolution Accurate Mass) pero que eluyan a tiempos diferentes indican que son isómeros. Los datos muestran claramente que la columna GlycanPac AXR-1 (con 73 picos que contienen 135 glicanos) resuelven y permite la identificación por MS de muchos más glicanos que con la columna Amide Hilic comercial de 1.7 μm (ACQUITY UPLC® BEH Amide, 2.1 x 150 mm, 1.7 μm) que resuelve muchos menos picos que contienen glicanos en los que estos compuestos de carga diferente coeluyen muchas veces. Ver Artículo Técnico.

N-Glicanos marcados 2AA con GlycanPac AXR-1 de 1.9 mm N-Glicanos marcados 2AB con GlycanPac AXR-1 de 1.9 mm
Especificaciones Dionex GlycanPac AXR-1
Rango Temperatura Ambiente - <60ºC.
Compatibilidad Fase Móvil pH 2.0-8.0.
Composición substrato Sílice de alta pureza prososa esférica. Substrato WAX e RP de modo mixto. 1.9 y 3 mm. 175 Å. 220 m2/g
Presión Operativa Máxima 1.9 mm 10000 psi (68.9 MPa) 2.1x100mm, 15000 psi (103.4 MPa)  2.1x150mm, 6000 psi (41.4 MPa) 2.1x250mm
Presión Operativa Máxima 3.0 mm 7000 psi (48.3 MPa)
Caudal recomendado 1.9 mm 0.2 a 0.4 mL/min para todas las columnas de 2.1mm
Caudal recomendado 3.0 mm 0.8 a 1.2 mL/min para 4.6mm, 0.3 a 0.6 mL/min para 3.0mm, 0.1 a 0.3 mL/min para 2.1mm
Columnas y Pre Columnas Dionex GlycanPac AXR-1
088255 GlycanPac AXR-1, 3 µm Columna Analítica 4.6 × 150 mm
088252 GlycanPac AXR-1, 3 µm Columna Analítica 3.0 × 150 mm
088251 GlycanPac AXR-1, 3 µm Columna Analítica 2.1 × 150 mm
088135 GlycanPac AXR-1, 1.9 µm Columna Analítica 2.1 × 250 mm
088136 GlycanPac AXR-1, 1.9 µm Columna Analítica 2.1 × 150 mm
088260 GlycanPac AXR-1, 3 µm, pre columna 4.6x10, pk 2. usar Holder V-2)
088259 GlycanPac AXR-1, 3 µm, pre columna 3.0x10, pk 2. usar Holder V-2)
088258 GlycanPac AXR-1, 3 µm, pre columna 2.1x10, pk 2. usar Holder V-2)
069580 Holder V-2
069707 Kit V-2 (Holder+Acoplador)
074188 Acoplador V-2 columna a precolumna
Publicaciones disponibles en Dionex GlycanPac AXR-1
Título Tipo Tamaño Descargar

Thermo Scientific GlycanPac AXR-1 Columns Product Manual

Manual 857 Kb
GLYCANPAC AXR-1 COLUMN Quick Start Manual 106 Kb

GlycanPac AXR-1 Columns For High Resolution Glycan Analysis

Esp. Producto 1.7 Mb
An U. High Res. Glycan Col. for Isomeric Sep. and the Struct.Ident. of Labeled N-Glycans from Proteins and Antibodies Póster 767 Kb
Separation of 2AA-Labeled N-Linked Glycans from Glycoproteins on a High-Resolution Mixed-Mode Column Hoja de Aplicación 699 Kb

Separation of 2AA-Labeled N-Linked Glycans from Human IgG on a High-Resolution Mixed-Mode Column

Hoja de Aplicación 691 Kb
Separation of 2AB-Labeled N-Linked Glycans from Bovine Fetuin on a Novel Ultra High Resolution Mixed-Mode Column Hoja de Aplicación 1.1 Mb

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